I biologisk forskning anvendes normalt polypeptider med en lang sekvens.For peptider med mere end 60 aminosyrer i sekvensen bruges genekspression og SDS-PAGE generelt til at opnå dem.Denne metode tager dog lang tid, og den endelige produktadskillelseseffekt er ikke god.
Udfordringer og løsninger til lang peptidsyntese
I syntesen af lange peptider står vi altid over for et problem, det vil sige, at den steriske hindring af kondensationsreaktionen stiger med stigningen i sekvensen i syntesen, og reaktionstiden skal justeres for at gøre reaktionen fuldstændig.Men jo længere reaktionstiden er, jo flere bivirkninger produceres der, og en del af målpeptidet dannes.Sådanne rester – mangelfulde peptidkæder er nøgleurenheder, der produceres i lang peptidsyntese.Derfor, i syntesen af langt peptid, er nøgleproblemet, vi skal overvinde, at udforske reaktionsbetingelserne og reaktionsmetoderne af høj kvalitet for at gøre aminosyrekondensationsreaktionen mere omfattende og fuld.Reducer desuden reaktionstiden, for jo længere reaktionstiden er, jo flere ukontrollerbare bireaktioner, jo mere komplekse er biprodukterne.Derfor er følgende tre punkter opsummeret:
Mikrobølgesyntese kan bruges: For nogle aminosyrer, der stødes på i synteseprocessen, og som ikke er lette at integrere, kan mikrobølgesyntese anvendes.Denne metode har bemærkelsesværdige resultater og reducerer reaktionstiden betydeligt og reducerer dannelsen af to vigtige biprodukter.
Fragmentsyntesemetode kan anvendes: Når nogle peptider er svære at syntetisere ved almindelige syntesemetoder og ikke nemme at rense, kan vi overtage hele kondenseringen af flere aminosyrer i et bestemt segment af peptidet til peptidkæden som helhed.Denne metode kan også løse mange problemer i syntesen.
Acylhydrazidsyntese kan anvendes: acylhydrazid syntese af peptider er en metode til fast-fase syntese af N-terminalt Cys peptid og C-terminalt polypeptid hydrazid kemisk selektiv reaktion mellem dannelsen af amidbindinger for at opnå peptidbindingsmetode.Baseret på positionen af Cys i peptidkæden opdeler denne metode hele peptidkæden i flere sekvenser og syntetiserer dem henholdsvis.Endelig opnås målpeptidet gennem væskefase kondensationsreaktion.Denne metode reducerer ikke kun syntesetiden for langt peptid markant, men øger også renheden af slutproduktet betydeligt.
Lang peptidoprensning
Det særlige ved lange peptider fører uundgåeligt til komplekse komponenter af rå peptider.Derfor er det også en udfordring at oprense lange peptider ved HPLC.amyloid serie af polypeptid rensning proces, absorberer en masse erfaring og med succes brugt i rensning af lange peptider.Ved at indføre nyt udstyr, blanding af flere oprensningssystemer, gentagne adskillelse og andre erfaringsmetoder, blev succesraten for lang peptidoprensning væsentligt forbedret.
Indlægstid: 18-apr-2023