Problemer og opløsninger af lang peptidsyntese

I biologisk forskning anvendes polypeptider med en lang sekvens normalt. For peptider med mere end 60 aminosyrer i sekvensen bruges genekspression og SDS-PAGE generelt til at opnå dem. Imidlertid tager denne metode lang tid, og den endelige produktseparationseffekt er ikke god.

Udfordringer og løsninger til lang peptidsyntese

I syntesen af ​​lange peptider står vi altid over for et problem, det vil sige den steriske hindring af kondensationsreaktionen øges med stigningen i sekvensen i syntesen, og reaktionstiden skal justeres for at gøre reaktionen fuldstændig. Jo længere reaktionstiden, jo flere bivirkninger produceres imidlertid, og der dannes en del af målpeptidet. Sådanne rester - mangelfulde peptidkæder er vigtige urenheder produceret i lang peptidsyntese. I syntesen af ​​lang peptid er det centrale problem, vi skal overvinde, derfor at undersøge reaktionsbetingelserne og reaktionsmetoderne af høj kvalitet for at gøre aminosyrekondensationsreaktionen mere omfattende og fuld. Reducer desuden reaktionstiden, fordi jo længere reaktionstiden, jo mere ukontrollerbare bivirkninger er, jo mere komplekse biprodukter. Derfor opsummeres de følgende tre punkter:

Mikrobølgesyntese kan anvendes: For nogle aminosyrer, der er stødt på i synteseprocessen, som ikke er lette at blive integreret, kan mikrobølgesyntese anvendes. Denne metode har bemærkelsesværdige resultater og reducerer reaktionstiden i høj grad og reducerer dannelsen af ​​to nøglebiprodukter.

Fragmentsyntesemetode kan anvendes: Når nogle peptider er vanskelige at syntetiseres ved almindelige syntesemetoder og ikke let at blive oprenset, kan vi anvende hele kondensationen af ​​flere aminosyrer i et bestemt segment af peptidet til peptidkæden som helhed. Denne metode kan også løse mange problemer i syntesen.

Acylhydrazidsyntese kan anvendes: Acylhydrazidsyntese af peptider er en metode til fastfasesyntese af N-terminal Cys-peptid og C-terminal polypeptidhydrazid-kemisk selektiv reaktion mellem dannelsen af ​​amidbindinger for at opnå peptidbindingsmetode. Baseret på placeringen af ​​Cys i peptidkæden opdeler denne metode hele peptidkæden i flere sekvenser og syntetiserer dem henholdsvis. Endelig opnås målpeptidet gennem væskefasekondensationsreaktion. Denne metode reducerer ikke kun meget syntesetiden for lang peptid, men øger også markant renheden af ​​det endelige produkt.

Lang peptidoprensning

Særlige lange peptider fører uundgåeligt til komplekse komponenter af rå peptider. Derfor er det også en udfordring at rense lange peptider af HPLC. Amyloid -serie af polypeptidoprensningsproces, absorberer en masse erfaring og med succes anvendt til oprensning af lang peptid. Ved at anvende nyt udstyr, blanding af flere oprensningssystemer, gentagen adskillelse og andre erfaringsmetoder blev succesraten for lang peptidoprensning i høj grad forbedret.